反相色譜柱是一種在液相色譜分析中常用的色譜柱，其核心特點在于固定相為非極性材料，而流動相為極性溶劑。具有高靈敏度和選擇性，能夠檢測出低濃度的成分，甚至達到痕量級別，同時實現(xiàn)不同成分的有效分離，尤其適用于復(fù)雜樣品的分析。其穩(wěn)定性好，色譜峰形狀和出峰時間穩(wěn)定，且應(yīng)用范圍廣泛，適用于多種不同類型和濃度的樣品分析，如蛋白質(zhì)、核酸、藥物、食品等。

　　反相色譜柱的主要作用：

　　1、分離極性化合物

　　反相色譜柱（如C18柱）的固定相為非極性（如十八烷基硅烷鍵合相），流動相為極性溶劑（如水、甲醇、乙腈等）。

　　疏水性強的組分與固定相吸附更緊密，保留時間較長；極性強的組分優(yōu)先被極性流動相洗脫，保留時間較短。

　　適用對象：肽類、核酸、有機酸、藥物活性成分等極性或中等極性物質(zhì)。

　　2、復(fù)雜樣品的組分分析

　　通過調(diào)整流動相的極性（如改變甲醇/水比例）、pH值或添加劑（如三氟已酸TFA），優(yōu)化不同組分的分離度。

　　示例：蛋白質(zhì)消化后的多肽混合物、中藥提取物中的活性成分分析。

　　3、制備級純化

　　在制藥、天然產(chǎn)物提取等領(lǐng)域，利用反相色譜柱進行大規(guī)模制備，收集高純度目標組分（如95%以上）。

　　特點：可處理復(fù)雜基質(zhì)，減少雜質(zhì)干擾。

　　4、去除雜質(zhì)或污染物

　　在生物制藥中，用于去除酶解產(chǎn)物中的鹽分、未反應(yīng)底物或變性蛋白。

　　在環(huán)境檢測中，分離水體中的極性污染物（如農(nóng)藥、抗生素）。