親水色譜柱是一種專門設(shè)計用于分離親水性和極性化合物的色譜柱。利用固定相上的親水性基團與樣品中的極性基團之間的相互作用，實現(xiàn)對極性化合物的有效分離。其工作原理基于親水作用和可能的離子交換作用。在分離過程中，水相固定相上的親水性基團與待分離物質(zhì)中的極性基團發(fā)生相互作用，從而實現(xiàn)物質(zhì)的分離和純化。

　　以下是使用親水色譜柱時需要注意的操作事項：

　　1、選擇合適的流動相

　　選擇合適溶劑：流動相應(yīng)選用色譜純試劑、高純水或雙蒸水。酸堿液及緩沖液需經(jīng)過濾后使用，以防止雜質(zhì)影響分析結(jié)果。

　　更換頻率：水相流動相需經(jīng)常更換（一般不超過2天），防止長菌變質(zhì)。

　　2、樣品處理

　　樣品過濾：采用過濾或離心方法處理樣品，確保樣品中不含固體顆粒。

　　樣品溶解：用流動相或比流動相弱（若為反相柱，則極性比流動相大；若為正相柱，則極性比流動相小）的溶劑制備樣品溶液。

　　3、色譜柱操作

　　保護柱使用：使用保護柱可以延長分析柱的使用壽命。

　　沖洗步驟：如所用流動相為含鹽流動相，反相色譜柱使用后，先用水或低濃度甲醇水（如5％甲醇水溶液），再用甲醇沖洗。

　　4、設(shè)備操作規(guī)程

　　開機步驟：打開所有電源，待自檢通過；在計算機中雙擊LC SOLUTION Lite圖標，進入工作站。

　　設(shè)置儀器方法：主要為LC采集時間、泵總流速及各泵流速、檢測器波長、柱溫箱溫度等；設(shè)置完成后，另存方法文件，并下載至設(shè)備。

　　基線平穩(wěn)：點擊圖標（儀器開/關(guān)），系統(tǒng)開始運行，觀察檢測器基線變化，如果基線平直穩(wěn)定不變，即認為接近平衡，可以調(diào)零等待。

　　進樣分析：點擊單次運行，編輯樣品參數(shù)（樣品名，方法文件名，數(shù)據(jù)存儲路徑—數(shù)據(jù)文件名，進樣量等），點擊確定后，樣品進樣。

　　數(shù)據(jù)處理：文件---打開數(shù)據(jù)文件---視圖---峰表，則可以查看保留時間，峰高，峰面積等，之后用Excel做標準曲線，根據(jù)未知樣品的峰面積求濃度。

　　關(guān)機步驟：分析結(jié)束后，更換洗液清洗流路系統(tǒng)（如用緩沖液，先用水清洗半小時），再有機溶劑清洗30分鐘以上，最后用有機溶劑封存；停止系統(tǒng)運行，在實時分析工作站中，點儀器開/關(guān)鍵即停止所有單元工作；退出實時分析界面，再完q退出；關(guān)閉單元電源開關(guān)。